Calibración de micropipetas

Explicamos qué es y cómo calibrar una micropipeta automática, aunque el procedimiento se puede aplicar a otros instrumentos.

Contenidos:

1. Calibración
2. Método gravimétrico
3. Errores de medición
4. Material necesario
5. Procedimiento de calibración

La pipeta automática (o micropipeta) es una instrumento de medición de precisión, por lo que requiere una calibración periódica más o menos frecuente según determinadas condiciones como son:

• Frecuencia del uso de la micropipeta.
• Tipo de uso de la micropipeta: algunos procedimientos requieren mayor exactitud.
• Naturaleza del líquido a operar.
• Número de personas que la utilizan.
• Recomendaciones del fabricante.

El método gravimétrico de calibración consiste en calcular la masa del líquido transferido (generalmente, agua destilada) para saber si se corresponde con la masa del volumen teórico.

Pasos:

1. Si la micropipeta tiene un volumen teórico de X, se calcula el peso de un volumen de X de agua.
2. Se realiza un número determinado (normalmente, 10) de transferencias de agua mediante la micropipeta, pesando el volumen transferido.
3. Se comparan las masas obtenidas con la masa teórica.

Hay que tener en cuenta este método de calibración requiere el uso de una balanza y, por tanto, los resultados dependen de la exactitud y precisión de la balanza. Calibrar la micropipeta con una balanza inexacta carece de sentido.

El error de medición de un instrumento es la diferencia entre el valor real y el valor obtenido. Básicamente, hay dos tipos de errores de medición:

Los factores ambientales pueden producir errores de medición, sobre todo, la temperatura. Otros agentes como la humedad o la presión también pueden influir.

La mayoría del material de laboratorio se calibra a 20°C (temperatura ambiente). Es una cuestión a tener en cuenta cuando se trabaja con soluciones frías o calientes debidas a la refrigeración, reacciones químicas, salas sin ventilación o cualquier otra circunstancia.

Material necesario para la calibración de micropipetas automáticas:

• Vaso de precipitado.
• Balanza analítica.
• Vidrio de reloj.
• Papel de filtro o absorbente.
• Agua destilada.
• Alcohol.

Pasos a seguir para la calibración:

1. Limpieza externa

Comprobar el estado de limpieza de la micropipeta, especialmente en la zona de inserción de la punta. Si es necesario, limpiar con alcohol y papel.

2. Estanquidad:

Aspirar agua destilada con la micropipeta, ponerla en posición vertical y observar durante unos segundos para comprobar que no gotea.

3. Exactitud y precisión:

• Comprobar que la balanza está calibrada.
• Depositar una cantidad suficiente de agua destilada en un vaso de precipitado para realizar las determinaciones.
• Realizar las mediciones con el método directo de pipeteo, poniendo a 0 la balanza en cada pesaje.
• Realizar el análisis estadístico (valor obtenido y valor teórico) para determinar el estado de la micropipeta.

Consejos:

• Para el pesaje se puede utilizar un vidrio de reloj, limpiado previamente con agua destilada y secado con papel absorbente.
• Deben realizarse al menos 10 pesajes. En cada pesaje se pulsa el botón de tara de la balanza y se limpia el vidrio de reloj.
• Calcular media, moda y desviación estándar.