Técnicas de PCR

Test 2

Test online

Test 2 sobre la PCR.

Conocimientos requeridos:

Ciclos.
Productos de amplificación.
Características de la PCR estándar o convencional.

Otros tests de PCR:

Pregunta 1

Selecciona la FALSA:

La proporción del número de productos deseados y no deseados depende del número de ciclos.

Al final del segundo ciclo hay el mismo número de productos deseados que de productos no deseados.

Al final del cuarto ciclo hay tantos productos deseados como no deseados.

Pregunta 2

Amplicón:

Fragmento del ADN molde que se desea amplificar.

Producto deseado que coincide con la secuencia que se desea amplificar.

Fragmento de ADN que contiene la secuencia que se desea amplificar en uno de sus extremos.

Pregunta 3

Selecciona la FALSA:

El número de productos no deseados se mantiene constante a partir del cuarto ciclo.

El número de amplicones aumenta exponencialmente.

El número de productos no deseados aumenta aritméticamente.

Pregunta 4

Si se parte de una cadena de ADN molde, tras n ciclos:

El número de productos no deseados es 2ⁿ.

El número de productos deseados es 2n.

El número de productos deseados es 2ⁿ.

Pregunta 5

PCR estándar o convencional:

Se realizan dos reacciones PCR acopladas, de modo que la segunda PCR utiliza como ADN molde los productos de amplificación de la primera.

Se amplifica un único fragmento de ADN, con un único par de cebadores y en un único proceso de amplificación.

Permite amplificar y analizar moléculas de ARNm.

Pregunta 6

Sobre el cloruro magnésico (MgCl₂) de la mezcla de reacción:

Una baja concentración de Mg²⁺ determina una menor fidelidad de replicación.

Se utiliza para proporcionar los iones Mg²⁺ que requieren las enzimas.

Ambas son ciertas.

Pregunta 7

Los dNTPs…

Son desoxinucleótidos trifosfato y ribonucleótidos trifosfato.

Deben estar presentes en la misma concentración para obtener una mayor fidelidad de la enzima.

Ambas son falsas.

Pregunta 8

Selecciona la FALSA:

Las altas concentraciones de ADN mejoran el rendimiento, pero supone un considerado incremento del coste.

La concentración de cada cebador en la mezcla de reacción debe ser la misma.

La elección de la ADN polimerasa depende de la fidelidad requerida, de la longitud de la secuencia a amplificar e, incluso, de la secuencia a amplificar.

Pregunta 9

Sobre el ADN molde:

Se requiere un alto grado de integridad.

Para ADN genómico humano, no es aconsejable sobrepasar los 10 ng por µL de mezcla de reacción.

Ambas son ciertas.

Pregunta 10

Selecciona la correcta:

Baja cantidad de ADN molde supone un bajo rendimiento.

Alta cantidad de ADN molde supone mayor número de productos no deseados.

Ambas son ciertas.

Pregunta 11

¿Cuál de los siguientes son contaminantes que inhiben la PCR?

EDTA y heparina.

SDS, cloroformo y hemoglobina.

Todos son contaminantes.

Pregunta 12

¿Cuáles de los siguientes aditivos disminuyen la T_m del ADN molde?

DMSO.

Formamida.

Ambas respuestas.

Pregunta 13

La gelatina, el glicerol y el polietilenglicol son aditivos que…

Disminuyen la T_m del ADN molde.

Disminuyen la T_m de los cebadores.

Estabilizan la Taq polimerasa.

Pregunta 14

La mezcla master o master mix es…

La mezcla de reacción, que incluye todos los componentes, el ADN molde, aditivos y potenciadores.

La mezcla de reacción, que incluye todos los componentes y el ADN molde.

La mezcla de reacción, que incluye todos los componentes, excepto el ADN molde.

Pregunta 15

¿Cómo se denomina el control que contiene el fragmento que se quiere amplificar?

Control positivo.

Control negativo.

Control blanco.

Pregunta 16

Selecciona la correcta:

Habitualmente, se realizan entre 25 y 35 ciclos de replicación.

Cuanto más abunde la secuencia a amplificar, más ciclos se precisan para obtener una cantidad suficiente de amplicones.

Ambas son ciertas.

Pregunta 17

Selecciona la FALSA: A partir de los 40 ciclos…

Es más probable que aparezcan productos no deseados inespecíficos.

Los tiempos de incubación de las fases deben prolongarse.

La ADN polimerasa pierde actividad.

Pregunta 18

¿Cuál de las siguientes etapas se realiza a temperatura óptima de la polimerasa?

Desnaturalización inicial.

Extensión final.

Mantenimiento.

Pregunta 19

El análisis de los productos amplificados se realiza mediante…

Espectrofotometría.

Electroforesis.

Ambas opciones.

Pregunta 20

Para descartar un falso positivo por contaminación, se analiza el…

Control positivo.

Control negativo.

Ninguno de ellos.

Pregunta 21

Para descartar un falso negativo por presencia de inhibidores de PCR o algún reactivo defectuoso, se analiza el…

Control positivo.

Control negativo.

Control blanco.

Pregunta 22

Al analizar los resultados de la PCR mediante electroforesis:

La PCR se ha realizado correctamente si aparecen varias bandas de distintos tamaños.

Presencia de productos de amplificación no deseados si hay una única banda.

Ambas son falsas.

Pregunta 23

Sean A₂₆₀ y A₂₈₀ las absorbancias a 260nm y 280nm, respectivamente, del ADN molde. El cociente A₂₆₀/A₂₈₀, debe ser…

Inferior a 1,7.

Entre 1,7 y 2.

Superior a 2.

Pregunta 24

La PCR estándar con inicio en caliente…

Evita la aparición de productos de amplificación no deseados.

Permite aumentar el rendimiento cuando se quieren amplificar secuencias de entre 5 y 35kb.

Evita la aparición de mutaciones en los amplicones.

Pregunta 25

Se caracteriza por el uso de una alta concentración de ADN polimerasas sin actividad correctora y una baja concentración de ADN polimerasas con actividad correctora: